Mesure de l'activité enzymatique

Des études pilotes menées en zones côtières en Manche et en Mer du Nord ainsi que l'organisation d'exercices d'intercalibration internationaux dans les années 1990, ont favorisé la validation méthodologique de la mesure de l'activité enzymatique éthoxyrésorufine-O-dééthylase (ÉROD) dépendante du système CYP4501A. Ces différentes étapes constituent les bases de développement d'un biomarqueur de détoxication dans un objectif d'application en surveillance. La méthode de dosage de l'activité enzymatique ÉROD sur lecteur microplaque en fluorescence présente l'intérêt d'une méthode rapide, peu coûteuse et simple, de mise en oeuvre. La méthode décrite est le résultat d'une expérience acquise depuis dix ans avec le soutien du Réseau national d'observation. Quelques données obtenues sur des poissons marins collectés dans leur habitat naturel et exposés en laboratoire permettent de présenter une fourchette de variations utiles à l'interprétation des activités enzymatiques ÉROD sur les côtes de la Manche, Mer du Nord et de la Méditerranée.

Mots-clés: activité enzymatique ÉROD, biomarqueur de détoxication, lecteur en microplaque, foie de poisson, exercices d'intercalibration.

Pilot studies conducted in the English Channel and North Sea, along with international intercalibration exercises in the 1990s, have helped validate the method for measurement of ethoxyresorufin-O-deethylase (EROD) which is dependent on the CYP4501A system. These stages have provided the basis to develop a detoxification biomarker for use in monitoring applications. The fluorescence-based EROD enzyme microplate assay has the advantage of being a fast, inexpensive and easily implemented method. The method described is the outcome of ten years of experience supported by the national observation network RN0. Some data on marine finfish collected in their natural environment and subjected to exposure in the laboratory are used to present a range of variations of use in interpreting EROD enzyme activity on the Channel, North Sea and Mediterranean coasts.

Keywords: EROD enzyme activity, detoxification biomarker, microplate assay, fish liver, intercalibration exercises.